一、 原理  本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測水產和雞肉等組織樣本中的硝呋索爾，在微孔條上預包被上偶聯抗原，利用抗原與抗體的特異性免疫化學反應的原理來進行的，樣本中的硝呋索爾和微孔條上預包被偶聯抗原競爭抗硝呋索爾衍生物抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣品中的硝呋索爾含量與樣品的吸光度值呈反比，與標準曲線比較即可得出硝呋索爾含量。 二、 試劑盒技術指標：試劑盒靈敏度：  0.1ppb樣本檢測下限：組織、蜂蜜         0.2ppb魚/蝦等水產品組織因存在一定的干擾，檢測下限為0.3ppb回收率：魚/蝦水產組織    90%±15%蜂蜜/雞肉/肝臟樣本  80%±15%交叉反應率：硝呋索爾代謝物  100%呋喃唑酮代謝物  ﹤0.1%呋喃妥因代謝物﹤0.1%呋喃西林代謝物﹤0.1% 三、試劑盒組成1．微量測試孔：96T/8孔2．標準品液： 0ppb  0.1 ppb  0.3ppb  0.9ppb  2.7ppb  8.1ppb （1ml/瓶）3．酶標記物                12ml4．抗體工作液              7ml5．底物緩沖液              7 ml6．底物液                  7 ml7．終止液                  7 ml8．20倍濃縮洗滌液         50 ml9．復溶液                  50 ml10．15.1mg衍生化試劑 四、 所用儀器、試劑具備的儀器：  微孔酶標儀、打印機、均質器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g） 微量移液器：  單道20μl-200μl，100μl-1000μl、多道250μl試       劑：  甲醇、氫氧化鈉、乙酸乙酯、正己烷、濃HCl、磷酸氫二鉀、鄰硝基苯甲醛、亞硝基鐵氰化鉀（K₂Fe（CN）₅·NO·3H₂O）ZnSO₄·7H₂O 五、樣本前處理步驟樣本處理前須知處理任何樣本時，都必須注意：（a）實驗中必須使用性吸頭，在吸取不同的試劑時要更換吸頭。（b）實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈，必要時可對實驗器具進行清潔，以避免污染干擾實驗結果。樣本前處理需配制：1．衍生化試劑 稱15.1mg鄰硝基苯甲醛加甲醇10ml溶解(濃度10mM)2．C液：（供奶樣用）稱12.5g亞硝基鐵氰化鉀用去離子水定溶至100ml。      D液：（供奶樣用）稱29.8g 硫酸鋅用去離子水溶解定溶至100ml。3．0.1M K₂HPO₄ 稱22.8g K₂HPO₄·3H₂O加去離子水溶解定溶至1L4．1M HCl取8.6ml濃HCl加水定溶至100ml。5．1M NaOH稱取4g NaOH加水定溶至100ml。樣本的處理(a) 肉樣或魚蝦用均質器均質樣本,接（d）的描述方法(b) 奶樣1. 取出5ml的奶樣本到玻璃離心管中,分別加入C液和D液各250μl。2. 用振蕩器充分混合樣本,用恒溫離心機4000r/min以上離心10min(4-12℃).若沒有恒溫離心機,則先將樣本降溫至大約8℃,然后離心。3. 接(d)的描述方法(c) 蜂蜜  1. 取1±0.05g樣本到離心管中。2. 加入4ml的去離子水溶解,再加入0.5ml 1M HCl和100μl衍生化試劑,充分振蕩。3. 接(d)第2步描述方法(d)接上面的方法1. 取1±0.05g的均質樣本(肉樣/魚蝦)、牛奶的離心上清液1.1ml（相當1ml奶樣），分別加入4ml的去離子水，0.5ml 1M HCl和100μl衍生化試劑，充分振蕩。2. 置于56℃環境中孵育（2h）。3. 分別加入5ml 0.1M K₂HPO_4， 0.4 ml 1M NaOH和5ml的乙酸乙酯，充分振蕩30s；4. 在室溫下（20-25℃）4000r/min以上離心10min。5. 取出2.5ml的乙酸乙酯到另一潔凈容器中于50℃氮氣/空氣吹干。    6. 用1ml正己烷溶解干燥物，用1ml已稀釋好的復溶液充分混合；在室溫下（20-25℃）4000r/min以上離心10min。7. 取50μl下層相用于分析。樣本稀釋倍數：2