性能參數(shù)

產(chǎn)品名稱：小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格： 48T/96T

產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國(guó)

品牌商標(biāo)： RD/TSZ

價(jià)    格：（具體優(yōu)惠價(jià)格請(qǐng)咨詢業(yè)務(wù)員）

適用物種： 動(dòng)物

供貨數(shù)量:  150

小起訂： 1盒

應(yīng)用范圍： 科研Elisa檢測(cè)

詳細(xì)資料： 實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)資料

誠(chéng)信指數(shù)：129點(diǎn)

供貨所在地：上海

發(fā)貨期限：至買家付款后1-2天發(fā)貨，部分期貨需要貨期4周

了解更多：進(jìn)入公司展臺(tái)

使用范圍：限科研使用，不能應(yīng)用于

小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒結(jié)果計(jì)算：

在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸，相應(yīng)的OD值為Y軸，用四參數(shù)或?qū)?shù)-對(duì)數(shù)法繪制合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線。濃度與OD值成反比關(guān)系，隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加，黃色強(qiáng)度就減少，即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。如果樣本實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行了稀釋，則試劑盒后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線為逆向S型曲線。

附：采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè)，檢測(cè)前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù)，如坐標(biāo)參數(shù)（線性，半對(duì)數(shù)）和計(jì)算方式參數(shù)（三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程），即可直接得到結(jié)果。

產(chǎn)品名稱存放：收到貨后貯存于4℃，盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃，將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來，貯存于4℃，已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品，生物標(biāo)記物，體和HRP貯存于4℃。

試劑的準(zhǔn)備 

按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑. ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的.自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正.從冰箱中取出的試 驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用.試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存. 

小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒的準(zhǔn)備之洗滌

洗滌在 ELISA 過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA 就是靠洗滌來分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相原或體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而

在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。可以說在ELISA 操作中，洗滌是主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。

洗滌的方式除某些 ELISA 儀器配有的自動(dòng)洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下：

(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)；c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2 分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)徹底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復(fù)操作c 和d，洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫 20，其濃度可在0.05%-0.2%

之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的原或體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。

(2)流水沖洗式流水沖洗法初用于小珠載體的洗滌，洗滌液為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗 2 分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2 分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為徹底，且也簡(jiǎn)便、快速。

已有，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法水流量或水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。

“小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒”試劑的準(zhǔn)備之顯色

顯色是 ELISA 中的后一步溫育反應(yīng)，此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽(yáng)性孔則間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，及時(shí)判斷。

OPD 底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30 分鐘后即加深，再延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，可使本底值增高。

OPD 底物液受光照會(huì)自行變色，顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行，顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD 產(chǎn)物用終止后，顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。

T 受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺(tái)上，邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性，宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。T 經(jīng)HRP 作用后，約40 分鐘顯色達(dá)，隨即逐漸減弱，至2 小時(shí)后即可消退至無色。T 的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24 小時(shí))不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。